花卉芽的增殖方法

这一阶段是快速繁殖技术最重要的一环。在这～阶段潜在的植物个体（芽或胚状体）通过侧芽的形成和生长、外植体产生的愈伤组织上不定芽的形成和胚状体发生三条途径，在数量上得以迅速增殖。由于植物种类的不同，可采用不同的途径。

(1)促进侧芽的形成和生长：高等植物的每一个叶腋中通常都存在着腋芽，在一定条件下可使其生长。顶端优势抑制侧芽生长可被外源的细胞分裂素打破，所以在利用这条途径时，在培养基中几乎都要加入细胞分裂素（有时也同时加入少量生长素）。由于细胞分裂素的持续作用，侧芽不断分化和生长，逐渐形成芽丛。反复切割并转移到新的培养基中继代培养，就可在短期内得到大量的芽。

有些植物即使在含有细胞分裂素的培养基中顶端优势也不易被打破，接种的茎尖和芽只能长成不分枝的一根枝条，此时可用切段法（每切段带有一个叶片）加以繁殖。

利用侧芽的分化和生长使芽增殖的主要优点是能保持遗传的稳定性，因为茎尖的细胞常是均一的二倍体细胞，它不易受培养条件的影响而发生变异，它对于保持嵌合体的性状也是一个好办法。目前已有近百种植物可用这种方法进行快速繁殖，如苹果、非洲菊、月季等。

在培养时培养基中加入的细胞分裂紊，一般浓度在O.I-IO毫克／升（多为1-2毫克／升）。在几种细胞分裂素中用得最多的是6-BA，其次是KT和异戊基腺甘。对于具体植物，使用细胞分裂素的种类和浓度可根据已有资料或通过试验才能决定。

除了细胞分裂素外，在培养基中还经常加入低浓度的生长素以促进腋芽的生长，但要防止引起愈伤组织化。常用的生长素是NAA、IAA和IBA，使用浓度一般为0.1-1毫克／升。另外在某些培养基中低浓度的赤霉素对促进侧芽的伸长有效。

侧芽的增殖除了和基本培养基、激素、外植体来源等有关外，有时还与继代培养的次数有关，如苹果、月季，随着继代培养次数的增加，侧芽增殖的速度会逐渐提高。

(2)诱导不定芽的形成：从现存的芽之外的任何组织器官上通过器官发生重新形成的芽称为不定芽。在自然条件下有很多植物的器官可以产生不定芽，如苹果树的根、风信子的鳞片、秋海棠的叶等。在培养条件下，由于所需要的外植体极小，又加上激素的作用，可以使这种能力得到很好的发挥，如秋海棠的叶切段放在培养基中，可产生成千上万个芽。在培养条件下还能使通常不产生不定芽的器官形成不定芽，如菊花的花器官和叶片，百合、水仙的鳞片，萱草的花茎等。

使用在外植体上形成不定芽的方法，要避免使用浓度过高的激素和2，4-D等活性极强的生长素，以防止遗传变异的发生。不定芽也可在愈伤组织上产生，但如经过愈伤组织阶段，特别是多次继代的愈伤组织，不但器官分化能力会逐渐降低以至完全丧失，遗传性也常难保持稳定。#p#分页标题#e#

在诱导外植体上形成不定芽时，一般使用细胞分裂素浓度高于生长素浓度的激素配比。但也经常采用细胞分裂素和生长素的比值接近于1的配比。浓度范围一般在0.1-10毫克／升。常用细胞分裂素种类是6-BA和KT，生长素种类是NAA、IAA和IBA。外源激素的供应只是一个方面，器官分化的性质还要决定于内源激素的状况。对于不同的植物，使用的激素种类和浓度常有较大的变化，在具体操作时要进行试验筛选才能找到适当的配比。

(3)诱导胚状体的形成：在自然条件下，只有少数植物可以由珠心产生胚状体，在培养条件下，现在已有上百种植物可以产生胚状体。在诱导胚状体形成时一般使用胚、分生组织或生殖器官作为外植体。在一个含有丰富还原态氮的培养基上，在存在生长素，特别是2，4-D时诱导胚状体的发生，然后转移到降低浓度或没有生长素的培养基上使胚状体成熟和生长。

胚状体途径的优点是增殖率高，而且胚状体是双极性的，可以免去生根这一步。但是目前由于很多重要的作物还不能形成胚状体，或产生的胚状体难以形成植株或成苗率太低，除柑橘、咖啡等少数作物外都不采用这条途径。

4．根的诱导：通过侧芽和不定芽途径产生的芽长成嫩枝后，必需诱导生根才能移植。草本植物一般比木本植物容易生根。木本植物中，幼态树较成年树产生的芽和嫩枝容易生根。由于嫩枝本身能合成丰富的生长素，所以一部分植物可以在无激素的培养基上生根，其它需要在培养基中加入适量的生长素（一般浓度在0.1-10毫克／升之间），使用最多的生长素是NAA，其次是IBA和IAA。

在生根阶段除使用和第一阶段相同的基本培养基外，也经常使用盐度为1/3或1/2水平的培养基。蔗糖浓度可降低到1%-1.5%，以增强植株的自养能力，为此也常相应地提高光照强度(3000-10000勒克斯)。